支原体污染的检测、清除和预防攻略，快来收藏

胚胎干细胞中的支原体污染，.细胞形态没有改变；C-D使用Plasmocin™Treatment清除人胚胎干细胞中的支原体污染，对干细胞标记表达无副作用（蛋白质、mRNA）；E使用Plasmocin™Treatment去除人胚胎干细胞中的支原体污染，染色体没有异常。

2.支原体清除备选试剂——Plasmocure™

Plasmocure™是一种作为第二防线的抗支原体试剂，能有效地消除对Plasmocin™产生抗性的支原体。它结合了两种抗生素，通过不同于Plasmocin™的机制治疗支原体。第一种抗生素与核糖体的50S亚基结合并阻断肽基转移酶的活性。第二种抗生素结合到异亮氨酸-tRNA合成酶，阻止异亮氨酸并入支原体蛋白。这些特异性靶点在真核细胞中都不存在，确保Plasmocure™的低细胞毒性。

图10Plasmocure™操作流程

适合用于带有Plasmocin™抗药性支原体

➔快速：在2周内拯救细胞培养物

➔安全：对哺乳动物细胞毒性低

➔可靠：支原体再生率极低

去除支原体污染Tips

1）最佳的处理浓度：建议按照说明书的方案，使用3种浓度测试，以及一个不经任何处理的实验条件。

2）备用的细胞：保留没有处理过的细胞培养物复制品和/或冻存品，验证治疗效果，如有必要，以新的治疗条件重新测试。

3）替代的试剂：假如使用Plasmocin™未有达到预期功效，可尝试使用Plasmocure™，反之亦然。

4）定期测试：使用MycoStrip™或PlasmoTest™尽早进行支原体检测，以及时去除污染。建议每约2-3周为您的细胞培养物测试一次。

3.支原体清除产品选择表

三、支原体污染的预防

1.支原体专用预防试剂——Plasmocin™Prophylactic

Plasmocin™Prophylactic工作浓度经过优化，可定期用于预防支原体污染。

2.原代细胞及干细胞污染预防试剂——Primocin™（支原体、细菌和真菌）

Primocin™含有四种化合物，其中三种阻止了革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和支原体的DNA和蛋白合成。第四种化合物通过破坏细胞膜的离子交换来根除真菌，包括酵母。Primocin™已成功用于许多原代细胞，包括鼠源和人源肿瘤源细胞系、胚胎细胞和诱导性多能干细胞。

➔广谱高效：杀灭支原体、细菌和真菌

➔安全：对原代细胞无毒

➔NatureProtocols持续引用，用于原代细胞、胚胎细胞、iPS、类器官。

表1Primocin™和普通双抗对比

3.常规细胞系污染预防试剂——Normocin™（支原体、细菌和真菌）

Normocin™是包含三种抗生素的创新配方，具有抗支原体、细菌（革兰氏阳性和革兰氏阴性）和真菌（包括酵母）的活性。它被广泛使用及引用为细胞培养基中的“常规添加物”来防止污染。Normocin™可与青霉素和链霉素（Pen-Strep）溶液结合使用，以扩大抗菌谱。Normocin™能提供最大限度的保护，并以最低的细胞毒性防止微生物污染。

➔广谱高效：杀灭支原体、细菌和真菌

➔安全：对哺乳动物细胞毒性极低

➔张锋实验室引用，可与双抗结合使用扩大抗菌谱，推荐用于细胞系的污染预防。

表2Normocin™和普通双抗对比

相关产品信息：

参

考

文

献

1.,2002.Mycoplasmacontaminationofcelcultures:incidence,sources,effects,detection,elimination,:75.

2.,2010.Thes(2):211-3.
3.,2000.CuttingEdge:PreferentiallytheR-StereoisomeroftheMycoplasmalLipopeptideMacrophage-ActivatingLipopeptide-2ActivatesImmuneC:554-557.
4.,2003.Mycopl(4):812-4
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6.,2010.Mycopl(3):e9900
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8.UphoffcCetal.,2012.:26767.
9.RongvauxAetal.,2014.Devel(4):36472.
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11..2012.GenerationofinducedpluripotentstemcelsfromhumanTenon＇:2871-81.
12.,2019.EffectivenessofPlasmocureineliminationofmycoplasmaspeciesfromcontaminatedcelcultures:acomparativestudyversus
(2):143-149.

InvivoGen1977年成立于法国，是法国最早的生物科技公司。公司成立的初期阶段主要提供细胞培养相关试剂，如抗支原体、细菌、真菌污染的抗生素以及基因筛选抗生素（Zeocin™,Blasticidin,Puromycin,HygromycinBGold,G418,Phleomycin）。随着天然免疫研究热点的兴起，InvivoGen于2000年开始致力于天然免疫相关产品的研发和生产，并成为全世界优质、专业的天然免疫相关产品生产商。InvivoGen为天然免疫研究提供一整套研究方案，包括不断更新的模式识别受体（PRRs）激动剂和拮抗剂，PRRs报告基因细胞以及天然免疫信号通路的诱导剂和抑制剂等。